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也因此倍受人们重视

聚乙烯吡咯烷酮(polyvinylpyrrolidone,高效简称为PVP)是液相乙烯一种非离子型高分子化合物,是色谱N-乙烯基酰胺类聚合物中有特色且被研究得最深、最广泛的法测精细化学品品种之一。PVP作为一种合成水溶性高分子化合物,定隐具有水溶性高分子化合物的形眼一般性质,如胶体保护作用、镜护成膜性、理液粘结性、中聚吸湿性、吡咯增溶或凝聚作用。烷酮但PVP最具特色的高效是其优异的溶解性能及生理相容性,也因此倍受人们重视。液相乙烯PVP不参与人体新陈代谢,色谱又具有优良的法测生物相容性,对皮肤、粘膜、眼等不形成任何刺激。PVP用于隐形眼镜,可增加镜片的亲水性和润滑性,这使得PVP在隐形眼镜护理液中得到了广泛应用。

GB19192—2003《角膜接触镜护理液卫生要求》第4条明确提出对角膜接触镜护理液有效成分含量检测的技术要求。聚乙烯吡咯烷酮作为隐形眼镜护理液的有效成分之一,应明确其实际加入的有效量,并建立有效、快捷、准确的分析测定方法。

目前PVP含量的测定方法主要有紫外分光光度法、凝胶色谱检测法,但是这些方法的灵敏度不高,方法条件复杂,操作过程繁琐,且干扰不易消除。角膜接触镜护理液中基体复杂,样品的杂质峰干扰相对严重,难以准确定量,目前此样品尚无有效的检测方法。笔者采用SAX色谱柱对隐形眼镜护理液样品进行分离,在220nm波长处进行PVP的定量分析,经过一系列方法学试验验证,证明该方法准确、简单、高效。

1 实验部分

1.1 主要仪器与试剂

液相色谱仪:U3000型,美国赛默飞世尔科技公司。紫外分光光度计:UV2550型,日本岛津仪器有限公司。超纯水机:MC24T30CN型,出水电阻率为18.2MΩ,默克密理博(中国)有限公司。电子天平:ME104E型,感量为0.1mg,梅特勒–托利多仪器(上海)有限公司。氯化钠:色谱纯,上海阿拉丁生化科技股份有限公司。PVP对照品:纯度(质量分数)不小于99.0%,美国SigmaAldrich公司。角膜接触镜护理液样品:市售。

1.2 仪器工作条件

检测器:二极管阵列检测器;色谱柱:OligoSAX强阴离子交换柱(150mm×4.6mm,5μm,美国赛默飞世尔科技公司);流动相:20mmol/L氯化钠水溶液;流量:1.0mL/min;柱温:30℃;波长:220nm;进样体积:10μL。

1.3 样品处理

根据角膜接触镜护理液样品中PVP的标示含量,若PVP标示含量在0.01~0.5mg/mL之间,可直接进样;若PVP标示含量大于0.5mg/mL,取适量护理液样品,用超纯水稀释至约0.05mg/mL,作为供试液,待测。

1.4 溶液配制

PVP标准溶液:准确称取PVP对照品约0.1g,用超纯水配成1mg/mL的储备液。

PVP系列标准工作溶液:采用逐级稀释法,用超纯水配制PVP质量浓度分别为0.01、0.025、0.050、0.10、0.25、0.50mg/mL的系列标准工作溶液。

2 结果与讨论

2.1 仪器工作条件的优化

2.1.1 色谱柱

常规检测中,一般采用普通的C18反相色谱柱进行物质分离,而大分子量的样品,采用凝胶尺寸排阻色谱进行分离。试验考察了TSK-Gelα3000型亲水性凝胶色谱柱(300mm×7.8mm,7μm,日本TSK公司)和Oligo-SAX强阴离子交换柱的分离效果,结果发现,采用TSK-Gelα3000型凝胶色谱柱进行分离时,峰形拖尾严重且不对称,而在OligoSAX强阴离子交换色谱柱下,PVP能实现完好的分离,且无拖尾现象产生。因此采用Oligo-SAX强阴离子交换柱进行检测分析,可快速有效地分离PVP。

2.1.2 流动相

当采用纯水作为流动相时,色谱峰虽能分离,但出现拖尾现象,因此需要配制一定的缓冲溶液对PVP进行洗脱。试验采用氯化钠溶液作为流动相,考察氯化钠的质量浓度分别为0、10、20、50、100mmol/L时对PVP含量测定的影响,结果发现当溶液中氯化钠的质量浓度为20mmol/L时,拖尾现象消失,但随着氯化钠浓度的增大,PVP的分离没有其它变化。为了延长色谱柱的寿命,宜选用较低浓度的流动相,因此,采用20mmol/L氯化钠溶液作为流动相较为适宜。

2.1.3 检测波长

分别取PVP标准工作溶液与空白基质溶液(按照隐形眼镜护理液的配方,配制不含PVP的隐形护理液作为空白基质溶液),在波长为200~300nm范围内进行扫描,结果显示PVP在波长220nm附近有较大吸收,且空白基质溶液吸收较小,因此选择220nm作为PVP含量的检测波长。

2.2 色谱行为

按照1.2仪器工作条件,对0.05mg/mLPVP标准溶液和待测护理液的供试液进行测定,色谱图分别见图2和图3。由图2和图3可知,PVP的保留时间为0.933min。

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